1.HIV1/2抗體、抗原檢測
包括篩查試驗(含初篩和複檢)和確證試驗。 HIV1/2抗體篩查方法包括ELISA法、化學發光法或免疫螢光試驗、快速檢測(斑點ELISA和斑點免疫膠體金或膠體硒快速試驗、明膠顆粒凝集試驗、免疫層析試驗)等,確證試驗常用的方法是免疫印跡法。
篩查試驗呈陰性反應可出具HIV1/2抗體陰性報告,見於未被HIV感染的個體,但處於視窗期的新近感染者篩查試驗也可呈陰性反應。 若呈陽性反應,應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重複檢測,或另外兩種不同原理或不同廠家的試
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劑進行重複檢測,如兩種試劑複測均呈陰性反應,則為HIV抗體陰性; 如有一種或兩種試劑呈陽性反應,需進行HIV抗體確證試驗。 確證試驗無HIV特異性條帶產生,報告HIV1/2抗體陰性。 確證試驗出現HIV1/2抗體特異帶,但不足以判定陽性,報告HIV1/2抗體不確定,可在4周后隨訪。 如帶型沒有進展或呈陰性反應,則報告陰性; 如隨訪期間發生帶型進展,符合HIV抗體陽性判定標準則為HIV抗體陽性,如帶型仍不滿足陽性標準,繼續隨訪到8周。 如帶型沒有進展或呈陰性反應則報告陰性; 滿足HIV陽性診斷標準則報告陽性,不滿足陽性標準可視情況決定是否繼續隨訪。 經確證試驗HIV1/2抗體陽性者,出具HIV1/2抗體陽性確認報告,並按規定做好諮詢、保密和報告工作。
抗原檢測:主要檢測HIV1的P24抗原核心蛋白。 感染早期和晚期,P24抗原以遊離形式出現,多數情況下以抗原抗體複合物形式存在。 P24一般在感染后1-2周內即可檢出,隨P24抗體產生而減少。 一般持續0.5-5個月,如持續存在或再度出現則提示預後不良。
2.病毒載量測定
常用方法有反轉錄PCR(RT
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-PCR)、核酸序列依賴性擴增(NASBANuclisens)、分枝DNA信號放大系統(bDNA)和實時螢光定量PCR擴增(realtime PCR)。 病毒載量測定的臨床意義包括預測疾病進程、提供開始抗病毒治療依據、評估治療效果、指導治療方案調整以及HIV感染早期診斷的參考指標。 小於18月齡的嬰幼兒HIV感染診斷可以採用核酸檢測方法,以2次核酸檢測陽性結果作為診斷的參考依據,18月齡以後再經抗體檢測確認。 HIV病毒載量檢測結果低於檢測下限,報告本次實驗結果低於檢測下限,見於沒有感染HIV的個體、接受成功的抗病毒治療或機體自身可有效抑制病毒複製的部分HIV感染者。 HIV病毒載量檢測結果高於檢測下限,可作為診斷HIV感染的輔助指標,但不能單獨用於HIV感染的診斷。 推薦病毒載量檢測頻率:對於已接受抗病毒治療6個月以上、病毒持續抑制的患者,可每6個月檢測1次。 HAART6個月內或病毒載量抑制不理想或需調整治療方案時病毒載量的檢測頻率需根據患者的具體情況由臨床醫師決定。 如條件允許,建議未治療的無癥狀HIV感染者每年檢測1次,HAART初始治療或調整治療方案前、初治或調整治療方案初期每4~8周檢測1次。 病毒載量低於檢測下限后,每3~4個月檢測1次,對於依從性好、病毒持續抑制達2~3年以上、臨床和免疫學狀態平穩的患者可每6個月檢測1次。
3.CD4+T淋巴细胞检测
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HIV感染人体后,出现CD4+T淋巴细胞进行性减少,CD4+/CD8+T细胞比值倒置,细胞免疫功能受损。如果进行HAART,CD4+T淋巴细胞在病程的不同阶段可有不同程度的增加。目前常用的CD4+T淋巴细胞亚群检测方法为流式细胞术,可以直接获得CD4+T淋巴细胞数绝对值,或通过WBC分类计数后换算为CD4+T淋巴细胞绝对数。CD4+T淋巴细胞计数的临床意义是了解机体的免疫状态和病程进展、确定疾病分期和治疗时机、判断治疗效果和HIV感染者的临床合并症。
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